CONFIRMAÇÃO DO ENVOLVIMENTO DO PROTEOSSOMO NA VIA DE DEGRADAÇÃO DA ÓXIDO NÍTRICO SINTASE INDUZIDA EM MACRÓFAGOS INFECTADOS PELO TOXOPLASMA GONDII

Autores

  • Gabriel Rabello De Abreu Cabral
  • Juliana Da Cruz Padrão
  • Renato Augusto Damatta

Palavras-chave:

Macrófago, Toxoplasma gondii, Óxido Nítrico Sintase Induzida

Resumo

Toxoplasma gondii, parasito intracelular obrigatório, é agente causador da Toxoplasmose. Macrófagos ativados produzem óxido nítrico (NO) a partir de reação catalisa pela Óxido Nítrico Sintase induzida (iNOS), porém na infecção com T. gondii há a inibição dessa produção, pois a iNOS degrada. Proteossomo, calpaina e lisossomo estão envolvidos na degradação da iNOS; mas não se sabe qual é a via de degradação da iNOS durante a infecção de macrófagos pelo T. gondii, sendo necessário este estudo.A linhagem de macrófagos J774-A1 será mantida em garrafas de 25 cm², após atingir a confluência serão semeadas sob lamínulas em placas de 24 poços e placa de Petri, ativadas com interferon-gamma e lipopolissacarídeo, tratadas com calpeptina, Clasto-Lactocistina ?-Lactona ou NH4 e infectadas com T. gondii, cepa RH, obtido de camundongos. Lamínulas e sobrenadantes serão coletados para ensaio de imunofluorescência e western blot para revelar a iNOS e OPN; leitura de NO será realizada através do reagente de Griess.Esperamos confirmar os resultados preliminares que mostram que a iNOS está sendo degradada pelo proteossomo e que o lisossomo pode participar dessa degradação.A produção de NO é inibida na linhagem de macrófagos estudada e se dá pela degradação da iNOS que parece estar sendo degrada pela via do proteossomo, com possível participação da via do lisossomo.

Publicado

03-04-2012