INDUÇÃO DE CORPOS LIPÍDICOS EM DIFERENTES LINHAGENS DE MACRÓFAGOS MURINOS.

Resumo

Corpos lipídicos (CL) são organelas ricas em lipídios encontradas em praticamente todos os organismos. O aumento do número e do volume do CL ocorre comumente durante infecções, sendo sugerida a presença de CL como marcador estrutural em macrófagos inflamatórios. Nossos estudos têm demonstrado que macrófagos in vitro cultivados com soro homólogo (SH) apresentam aumento no número de CL por célula, sendo uma alternativa ao sacrifício de animais para obtenção de macrófagos.As linhagens de macrófagos murinos utilizadas foram RAW 2647, J774 A1, macrófagos alveolares, peritoneais e de medula óssea. As células in vitro foram cultivadas em DMEM suplementado com 5% de soro fetal bovino (SFB). Macrófagos peritoneais foram obtidos de camundongos machos adultos utilizando Hank´s, enquanto os de medula foram obtidos de fêmur de camundongo. O cultivo das células com SH e SFB, nas concentrações de 2% e 10%, foi realizado em uma placa de 24 poços, sobre lamínula redonda, durante 24 horas. Após este período, as amostras foram fixadas com formaldeído e preparadas para microscopia de fluorescência com o uso de vermelho de Nilo, marcador de lipídios.O cultivo com SH claramente induziu a formação de CL em todas as linhagens utilizadas quando comparado ao cultivo com SFB. Para a quantificação dos CL, os macrófagos foram divididos em grupos, dependendo da quantidade desta organela. Na concentração de 10% de SH os resultados foram semelhantes e promissores para todas as linhagens. Nos cultivos com 2% de SFB, a maior parte dos macrófagos não possuía nenhum CL, enquanto nos macrófagos cultivados com 10% de SH praticamente todos possuíam 10 ou mais CL por célula.O uso de SH para a indução de CL em linhagens in vitro de macrófagos murinos tem se revelado como uma boa alternativa ao uso de macrófagos provenientes de animais , diminuindo assim a necessidade do sacrifício de camundongos.