PARÂMETROS BIOQUÍMICOS DA ACETILCOLINESTERASE EM CÉREBRO DE PEIXES

Resumo

A aquicultura de peixes no Brasil cresce como reflexo do aumento do consumo desta forma de proteína pela população. Este incremento gerou preocupação quanto à ecotoxicologia de compostos voltados para o controle de doenças. O objetivo deste estudo é: Determinar parâmetros bioquímicos (KMap e Vmáx) da enzima cerebral acetilcolinesterase da tilápia (O. niloticus), o lambari (A. bimaculatus) e o curimatã (Prochilodus sp) visando estudos sobre a sensibilidade desta enzima aos organofosforados.Os peixes foram coletados em fazendas de aquicultura (tilápia e lambari) e em açude (curimatã) da UPEA-IFF. Os peixes (n=5, por espécie) foram anestesiados e sacrificados. Os cérebros foram retirados, conservados em banho de gelo e estocados em freezer a -20°C. Os tecidos foram homogeneizados em pool (5 indivíduos) com tampão fosfato de sódio. Depois da centrifugação a 9000 x g por 30 min à 4°C, recolheu-se o sobrenadante para os ensaios bioquímicos. A curva de substrato foi realizada utilizando-se 12 concentrações de substrato (0,015 até 15 mM). Os valores de KM e Vmáx foram calculados tendo por base o plote do duplo recíproco usando o programa Excel da Microsoft®.As curvas de substrato da tilápia e do lambari indicaram que as acetilcolinesterases (AChE ) destas espécies são semelhantes sendo suas médias: 0,0447±0,0156 mM para a constante de Michaelis-Menten aparente (KMap) de tilápia e 0,0456±0,0266 mM para o KMap do lambari. Enquanto o curimatã apresentou 0,2594±0,0992 mM para o KMap. Em relação à velocidade máxima (Vmáx) a tilápia e o lambari também apresentaram os valores de suas médias semelhantes 4,0349±0,5845 e 3,5291±1,2228 U.mL-1, respectivamente. O curimatã com a média de Vmáx de 6,3206±2,5683 U.mL-1.Para a tilápia e o lambari, os parâmetros determinados de KMap e Vmáx foram: apresentam a AChE semelhante em teor no cérebro e afinidade por um análogo da acetilcolina. O curimatã possui uma AChE distinta das espécies anteriores com teor tecidual maior e menor afinidade para esse substrato.