CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA DOS OVOS DO INSETO CALLOSOBRUCHUS MACULATUS

Autores

  • DANIEL BELLIENY RABELO
  • AMANDA JARDIM DE SOUZA
  • ELANE DA SILVA RIBEIRO
  • SIMONE CAYRES DE SOUZA
  • ANTÔNIA ELENIR AMÂNCIO OLIVEIRA

Palavras-chave:

Callosobruchus maculatus, vicilina, Vigna unguiculata

Resumo

Callosobruchus maculatus é a principal praga de sementes de Vigna unguiculata. As fêmeas fazem a postura dos ovos que fica aderido ao tegumento e posteriormente à larva penetra na semente onde completa seu desenvolvimento. Embora o ciclo de vida desses insetos seja bem conhecido, detalhes da constituição bioquímica metabolica dos ovos ainda não são completamente conhecidos. Desta forma o objetivo geral do projeto é estudar a composição bioquímica dos ovos do inseto Callosobruchus maculatus.Os insetos Callosobruchus maculatus foram obtidos a partir de uma colônia mantida no Laboratório de Química e Função de Proteínas e Peptídeos (LQFPP) da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro. Fêmeas foram colocadas em tubos de vidros com tampas de plástico contendo sementes de V. unguiculata por 24 horas. Os ovos presentes nas tampas foram observados diariamente para acompanhamento do comportamento das larvas e os ovos foram coletados diariamente até 6 dias após a oviposição. Os ovos foram extraídos na proporção de 80 ovos para 240µL em tampão PBS. O sobrenadante obtido foi submetido a dosagem de proteínas, vicilinas, amilase e visualizado por eletroforese.Os resultados obtidos mostram a presença de proteínas solúveis nos ovos desde o primeiro dia após a oviposição. Durante os seis primeiros dias após a oviposição ocorre uma redução significativa nesses níveis, principalmente no sexto dia. Por eletroforese observamos duas bandas protéicas majoritárias nos ovos no primeiro dia após a oviposição, uma em torno de 45 kDa e outra acima de 66 kDa. Os ensaios de ELISA demonstraram baixas concentrações de vicilinas nos ovos. Atividade de ?-amilase também foi detectada em todos os ovos analisados (até o sexto dia após a oviposição).A redução progressiva das proteínas nos ovos pode se dever ao consumo dessas moléculas como reserva energética para a formação das larvas. Vicilinas detectadas nesses ovos também podem servir como reservas. A presença de atividade de ?-amilase pode indicar a presença de reservas de polissacarídeos.

Publicado

29-03-2012